微(wei)生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)(wu)為廣(guang)泛分布于(yu)(yu)自然界中(zhong)的(de)一群肉眼看(kan)不到(dao)的(de)微(wei)小生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)(wu)，包(bao)括細(xi)菌(jun)、螺旋(xuan)體、立(li)克次體、衣原(yuan)體、支原(yuan)體、放線菌(jun)、真(zhen)菌(jun)、病毒等類，其(qi)結構簡(jian)單(dan)，以單(dan)細(xi)胞、細(xi)胞群體或(huo)非細(xi)胞狀態存(cun)在，在提供營養物(wu)(wu)(wu)質和(he)適宜環境的(de)條件(jian)下，一般都能獨(du)立(li)生(sheng)(sheng)活，迅速(su)生(sheng)(sheng)長繁殖(zhi)。為了避(bi)免微(wei)生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)(wu)死亡、污染，保(bao)(bao)(bao)持其(qi)原(yuan)有(you)性狀基本穩定，便于(yu)(yu)研究和(he)使用(yong)，需要用(yong)到(dao)菌(jun)種(zhong)保(bao)(bao)(bao)藏技術。菌(jun)種(zhong)的(de)保(bao)(bao)(bao)存(cun)主要是指通過(guo)降低細(xi)菌(jun)新陳代謝的(de)速(su)度, 使細(xi)菌(jun)的(de)生(sheng)(sheng)命活動處于(yu)(yu)半yongjiu性休(xiu)眠狀態, 以達到(dao)changqi保(bao)(bao)(bao)藏的(de)目的(de)以及減少菌(jun)種(zhong)的(de)更新需求來降低實驗生(sheng)(sheng)產成本。微(wei)生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)(wu)菌(jun)種(zhong)的(de)保(bao)(bao)(bao)存(cun)方法由于(yu)(yu)微(wei)生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)(wu)種(zhong)類的(de)不同而略(lve)有(you)差距，接下來給大家介(jie)紹一些常見的(de)菌(jun)種(zhong)保(bao)(bao)(bao)存(cun)的(de)方法：
1.低溫冷凍保藏法
該方法適(shi)合大多數需要changqi保(bao)(bao)(bao)存的(de)微生(sheng)物(wu)(wu)，病(bing)毒等。原理(li)為在(zai)超低(di)(di)溫(wen)環境下時，微生(sheng)物(wu)(wu)代(dai)謝活動(dong)停止，一(yi)般溫(wen)度越低(di)(di)效果越好。使用凍(dong)存管對菌種(zhong)進行(xing)保(bao)(bao)(bao)存，同時需要保(bao)(bao)(bao)護劑，一(yi)般使用甘油、脫脂羊粉(fen)或者二(er)甲(jia)亞砜等保(bao)(bao)(bao)護劑。講含(han)有菌種(zhong)的(de)凍(dong)存管置于(yu)-60~-80℃冰箱中冷凍(dong)保(bao)(bao)(bao)存。
2.液體石(shi)蠟(la)保藏法
液(ye)(ye)(ye)體(ti)石(shi)(shi)蠟(la)(la)保(bao)(bao)藏法(fa)(fa)(fa)適用(yong)(yong)于一些不能分(fen)解石(shi)(shi)蠟(la)(la)的(de)菌(jun)(jun)(jun)類，例如酵母菌(jun)(jun)(jun)、芽孢桿菌(jun)(jun)(jun)屬、青霉(mei)屬、曲霉(mei)屬等，一些細菌(jun)(jun)(jun)和真菌(jun)(jun)(jun)并不適合(he)用(yong)(yong)該方法(fa)(fa)(fa)進行保(bao)(bao)存。液(ye)(ye)(ye)體(ti)石(shi)(shi)蠟(la)(la)法(fa)(fa)(fa)使用(yong)(yong)液(ye)(ye)(ye)體(ti)石(shi)(shi)蠟(la)(la)覆蓋(gai)，微生物代謝被抑(yi)制，菌(jun)(jun)(jun)種(zhong)老化推(tui)遲。石(shi)(shi)蠟(la)(la)法(fa)(fa)(fa)可(ke)以防(fang)止氧(yang)(yang)氣(qi)進入，使得(de)需氧(yang)(yang)菌(jun)(jun)(jun)無(wu)法(fa)(fa)(fa)繼續生長(chang)，同時(shi)若培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基水分(fen)蒸(zheng)發(fa)，容易導(dao)致(zhi)細菌(jun)(jun)(jun)死亡，石(shi)(shi)蠟(la)(la)法(fa)(fa)(fa)可(ke)防(fang)止培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基水分(fen)蒸(zheng)發(fa)，延長(chang)菌(jun)(jun)(jun)種(zhong)保(bao)(bao)存時(shi)間。無(wu)菌(jun)(jun)(jun)條件下(xia)(xia)將(jiang)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)的(de)液(ye)(ye)(ye)體(ti)石(shi)(shi)蠟(la)(la)注(zhu)入剛培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)好的(de)斜面(mian)培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)物上，液(ye)(ye)(ye)面(mian)高(gao)出(chu)斜面(mian)頂端1cm~2cm，加膠(jiao)塞并用(yong)(yong)固(gu)體(ti)石(shi)(shi)蠟(la)(la)封(feng)口，使菌(jun)(jun)(jun)種(zhong)與空氣(qi)隔絕。將(jiang)注(zhu)人石(shi)(shi)蠟(la)(la)油的(de)菌(jun)(jun)(jun)種(zhong)斜面(mian)直立存放于低溫（4℃~6℃）干燥處或室(shi)溫下(xia)(xia)保(bao)(bao)存。
3.冷凍干燥(zao)保藏法
該方法(fa)適合(he)大多數微生(sheng)(sheng)物的(de)(de)保(bao)(bao)(bao)存(cun)，但不適用于不產(chan)孢(bao)子的(de)(de)絲狀真菌(jun)。冷凍(dong)干(gan)(gan)燥(zao)保(bao)(bao)(bao)藏法(fa)是在低溫(wen)(wen)、干(gan)(gan)燥(zao)、缺氧條件下保(bao)(bao)(bao)藏菌(jun)種。即在低溫(wen)(wen)條件下快速地(di)將(jiang)菌(jun)種凍(dong)結，使(shi)微生(sheng)(sheng)物保(bao)(bao)(bao)持完整(zheng)，然后減(jian)壓抽(chou)直空(kong)(kong)使(shi)冰升華直至脫(tuo)水(shui)干(gan)(gan)燥(zao)，并在直空(kong)(kong)狀態密(mi)封隔絕空(kong)(kong)氣，使(shi)微生(sheng)(sheng)物代(dai)謝活動停(ting)止，得以changqi保(bao)(bao)(bao)藏。按照(zhao)一定配方配置(zhi)保(bao)(bao)(bao)護劑加(jia)入(ru)安瓿管，然后再加(jia)入(ru)菌(jun)種制備成菌(jun)懸(xuan)液。先將(jiang)安瓿管進(jin)行預凍(dong)存(cun)至-15~-20℃，然后用冷凍(dong)真空(kong)(kong)干(gan)(gan)燥(zao)機對安瓿管進(jin)行干(gan)(gan)燥(zao)，并將(jiang)安瓿管進(jin)行熔封。（低溫(wen)(wen)避光保(bao)(bao)(bao)存(cun)）
4.沙土管(guan)保藏法
該(gai)方法適合用(yong)于(yu)(yu)產孢(bao)類放(fang)線菌(jun)(jun)(jun)(jun)、芽(ya)孢(bao)桿菌(jun)(jun)(jun)(jun)等的保存，不適合以菌(jun)(jun)(jun)(jun)絲發(fa)育為主的真菌(jun)(jun)(jun)(jun)和病原(yuan)性真菌(jun)(jun)(jun)(jun)的保藏。使用(yong)細沙(sha)(sha)土創(chuang)造干(gan)(gan)燥(zao)(zao)條件，使那些能夠產生(sheng)孢(bao)子或(huo)芽(ya)孢(bao)的微(wei)生(sheng)物在(zai)(zai)干(gan)(gan)燥(zao)(zao)環境中(zhong)的代謝活動減緩，抑制(zhi)其繁殖速度(du)，且抵抗力強不易死亡。該(gai)方法能減少(shao)菌(jun)(jun)(jun)(jun)株突變，延長存活時(shi)間(jian)。將河、海(hai)沙(sha)(sha)用(yong)60目過(guo)篩，棄(qi)去(qu)大顆粒(li)及雜質，再用(yong)80目過(guo)篩，去(qu)掉細沙(sha)(sha)。用(yong)吸鐵石吸去(qu)鐵質，放(fang)入容器中(zhong)用(yong)10%鹽酸(suan)浸(jin)泡，如河沙(sha)(sha)中(zhong)右(you)機物較多(duo)可用(yong)20%鹽酸(suan)浸(jin)泡。24h后倒去(qu)鹽酸(suan)，用(yong)自來(lai)水浸(jin)泡數(shu)次至(zhi)中(zhong)性，將沙(sha)(sha)子烘于(yu)(yu)或(huo)曬干(gan)(gan)。另取未(wei)被污染的地表(biao)以下十壤用(yong)100日討(tao)篩，自來(lai)水洗至(zhi)中(zhong)性，烘干(gan)(gan)。按沙(sha)(sha)：土=2：1混合均(jun)勻，分裝人安瓿管(guan)或(huo)小試管(guan)中(zhong)，高度(du)為1cm左右(you)，塞好棉(mian)塞，121℃高壓滅菌(jun)(jun)(jun)(jun)1~1.5h，或(huo)常壓間(jian)歇滅菌(jun)(jun)(jun)(jun)3次、每天每次16。在(zai)(zai)50℃以下烘干(gan)(gan)（溫度(du)不宜過(guo)高，影響(xiang)菌(jun)(jun)(jun)(jun)種性能），經檢查無(wu)微(wei)生(sheng)物生(sheng)長方可使用(yong)。之(zhi)后制(zhi)備菌(jun)(jun)(jun)(jun)懸液并將菌(jun)(jun)(jun)(jun)懸液加入沙(sha)(sha)土管(guan)中(zhong)。講含(han)有菌(jun)(jun)(jun)(jun)懸液的沙(sha)(sha)土管(guan)放(fang)入真空(kong)干(gan)(gan)燥(zao)(zao)器中(zhong)進行真空(kong)干(gan)(gan)燥(zao)(zao)。使用(yong)火焰封融管(guan)口(kou)，存放(fang)于(yu)(yu)低溫（4℃~10℃）或(huo)常溫干(gan)(gan)燥(zao)(zao)處，定期檢查活力及雜菌(jun)(jun)(jun)(jun)情況。
總(zong)訪問量：7387473 
