實(shi)驗開始前(qian)，各試劑(ji)(ji)均應(ying)平衡至室溫(wen)(試劑(ji)(ji)不能直接在37℃溶解(jie))；試劑(ji)(ji)或樣品(pin)稀釋時(shi)，均需(xu)混(hun)(hun)勻(yun)，混(hun)(hun)勻(yun)時(shi)盡量避免起泡(pao)。實(shi)驗前(qian)應(ying)預測樣品(pin)含量，如樣品(pin)濃度過高時(shi)，應(ying)對樣品(pin)進(jin)行稀釋，以使稀釋后的(de)樣品(pin)符合(he)試劑(ji)(ji)盒(he)的(de)檢測范(fan)圍，計算時(shi)再乘以相應(ying)的(de)稀釋倍數。

1.加樣(yang)(yang)：分別設空白孔(kong)、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待測(ce)樣(yang)(yang)品孔(kong)。空白孔(kong)加樣(yang)(yang)品稀釋液100μl，余(yu)孔(kong)分別加標(biao)準(zhun)品或待測(ce)樣(yang)(yang)品100μl，注(zhu)意不(bu)要有(you)氣泡(pao)，加樣(yang)(yang)將樣(yang)(yang)品加于(yu)酶標(biao)板孔(kong)底部，盡量(liang)不(bu)觸及孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃動混(hun)勻，酶標(biao)板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有(you)效性(xing)，每次實驗請使用新(xin)的標(biao)準(zhun)品溶液。

2.棄(qi)去(qu)液體(ti)，甩干(gan)，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工(gong)作液 100μl(在(zai)使(shi)用前一小時內配制)，酶(mei)標(biao)板加上覆膜, 37℃反(fan)應60分鐘。

3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩(shuai)干(gan)，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大(da)約400μl/每孔，甩(shuai)干(gan)(也可輕(qing)拍將孔內液體拍干(gan))。

4.每(mei)孔加檢(jian)測溶(rong)液(ye)B工作液(ye)(同檢(jian)測A工作液(ye)) 100μl，酶標板加上覆(fu)膜37℃反應60分鐘。

5.溫(wen)育60分鐘(zhong)后，棄去孔(kong)內液(ye)體，甩(shuai)干(gan)，洗板5次，每次浸(jin)泡1-2分鐘(zhong)，350μl/每孔(kong)，甩(shuai)干(gan)(也可(ke)輕拍將孔(kong)內液(ye)體拍干(gan))。

6.依序每孔(kong)加(jia)底物溶液(ye)90μl，酶(mei)標板加(jia)上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內，此(ci)時肉眼(yan)可見標準品(pin)的(de)前(qian)3-4孔(kong)有明顯的(de)梯(ti)度(du)蘭色，后(hou)3-4孔(kong)梯(ti)度(du)不明顯，即可終止(zhi))。

7.依序每孔加(jia)終(zhong)止(zhi)溶液50μl，終(zhong)止(zhi)反應(ying)，此時(shi)藍色立(li)轉黃色。終(zhong)止(zhi)液的加(jia)入順(shun)序應(ying)盡(jin)量與(yu)底物液的加(jia)入順(shun)序相同。為了保證(zheng)實驗結果的準(zhun)確性，底物反應(ying)時(shi)間到后應(ying)盡(jin)快加(jia)入終(zhong)止(zhi)液。

8.用酶聯儀(yi)在450nm波長依序(xu)測(ce)(ce)量各孔(kong)的光(guang)密度(OD值)。 在加終止液后立即(ji)進行檢(jian)測(ce)(ce)。

注意事項
IgG,大鼠免疫球蛋白GELISA試劑盒代測實驗注意事項：

1.試(shi)劑準備：所有試(shi)劑都必須(xu)在使(shi)用前達到室溫，使(shi)用后(hou)請(qing)立即按照說明書(shu)要求保存試(shi)劑。實驗操作中請(qing)使(shi)用一次性(xing)的吸頭，避免交叉污染。

2.加(jia)(jia)樣(yang)：加(jia)(jia)樣(yang)或(huo)加(jia)(jia)試劑時(shi)(shi)(shi)(shi)，請注意在(zai)吸取標(biao)(biao)本(ben) / 標(biao)(biao)準品，酶結合物或(huo)底物時(shi)(shi)(shi)(shi)，個(ge)孔與*后一個(ge)孔加(jia)(jia)樣(yang)之間(jian)的時(shi)(shi)(shi)(shi)間(jian)間(jian)隔(ge)如果太(tai)大，將會導致不同的 “預孵育(yu)"時(shi)(shi)(shi)(shi)間(jian)，從而明顯(xian)地影響到測量(liang)值的準確性及(ji)重復性。一次加(jia)(jia)樣(yang)時(shi)(shi)(shi)(shi)間(jian)(包括標(biao)(biao)準品及(ji)所(suo)有樣(yang)品)控制在(zai)10分鐘內，如標(biao)(biao)本(ben)數(shu)量(liang)多，推(tui)薦使用多道移液器(qi)加(jia)(jia)樣(yang)。

3.孵育：為防止樣品蒸(zheng)發(fa)，試驗時將反應(ying)板放(fang)于鋪有(you)濕布的(de)密閉盒內，酶標(biao)板加上蓋或覆(fu)膜(mo)，以避(bi)免(mian)(mian)液體蒸(zheng)發(fa)；洗板后(hou)應(ying)盡快進行下步操作(zuo)，任何(he)時侯都應(ying)避(bi)免(mian)(mian)酶標(biao)板處于干燥(zao)狀態(tai);同時應(ying)嚴格(ge)遵守給定的(de)孵育時間和溫度(du)。

4.洗(xi)(xi)滌(di)：洗(xi)(xi)滌(di)過程中(zhong)反應孔(kong)(kong)中(zhong)殘留的(de)洗(xi)(xi)滌(di)液應在濾(lv)紙(zhi)上充(chong)分(fen)拍干，勿將濾(lv)紙(zhi)直接放入反應孔(kong)(kong)中(zhong)吸水，同時(shi)要消除板底(di)殘留的(de)液體和手(shou)指印，避免影響*后的(de)酶(mei)標儀讀數(shu)。

5.試劑配(pei)(pei)制(zhi)：Detection A及Detection B在使(shi)用(yong)(yong)(yong)前請(qing)手甩幾下或(huo)少時(shi)(shi)離心處(chu)理，以使(shi)管(guan)壁或(huo)瓶蓋的液(ye)(ye)(ye)(ye)體(ti)沉積到管(guan)底。標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)、檢(jian)測(ce)(ce)(ce)溶(rong)液(ye)(ye)(ye)(ye)A工(gong)作液(ye)(ye)(ye)(ye)、檢(jian)測(ce)(ce)(ce)溶(rong)液(ye)(ye)(ye)(ye)B工(gong)作液(ye)(ye)(ye)(ye)請(qing)依據所(suo)需的量(liang)配(pei)(pei)置(zhi)使(shi)用(yong)(yong)(yong)，并使(shi)用(yong)(yong)(yong)相(xiang)應的稀釋(shi)(shi)液(ye)(ye)(ye)(ye)配(pei)(pei)制(zhi)，不能(neng)混淆。請(qing)精(jing)確配(pei)(pei)置(zhi)標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)及工(gong)作液(ye)(ye)(ye)(ye)，盡量(liang)不要微量(liang)配(pei)(pei)置(zhi)(如吸取(qu)檢(jian)測(ce)(ce)(ce)溶(rong)液(ye)(ye)(ye)(ye)A時(shi)(shi)，一次不要小于10μl)，以避免由于不準(zhun)(zhun)確稀釋(shi)(shi)而造(zao)成的濃度誤差；請(qing)勿重復使(shi)用(yong)(yong)(yong)已稀釋(shi)(shi)過(guo)的標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)、檢(jian)測(ce)(ce)(ce)溶(rong)液(ye)(ye)(ye)(ye)A工(gong)作液(ye)(ye)(ye)(ye)或(huo)檢(jian)測(ce)(ce)(ce)溶(rong)液(ye)(ye)(ye)(ye)B工(gong)作液(ye)(ye)(ye)(ye)。

6.反應時間的(de)控制：加入底物后(hou)請定時觀察反應孔(kong)的(de)顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較(jiao)深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過(guo)強從而影響酶標儀光密度讀數。

7.底物：底物請(qing)避(bi)光保存，在儲存和溫(wen)育(yu)時避(bi)免強光直接照(zhao)射(she)。建議檢測(ce)樣品(pin)時均(jun)設雙孔測(ce)定，以保證檢測(ce)結(jie)果(guo)的(de)準確性。

如標本中待測(ce)物質含量過高(gao)，請先(xian)稀釋后(hou)再(zai)測(ce)定，計(ji)算時請*后(hou)乘以(yi)稀釋倍數。

公司常見產品：

人(ren)常見(jian)ELISA試劑盒系(xi)列

人：IL-1、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-2R、IL-27、IL-23、IL-17、IL-18、IL-9、IL-8、IL-6、IL-5、IL-4、IL-2、IL-13、IL-11、IL-10、IL-12P70、IL-12P40、IFN-ω、IFN-β、IFN-α、 IFN-γ、TNF-β、TNF-α、sICAM-1、LEP、MMP-3等

大鼠常見ELISA試劑盒系列

大鼠(shu)：TNF-α、IL-1β、IL-7、IL-32、IL-21、IL-27、IL-23、IFN-γ、TGF-α、TGF-β1等

小鼠常(chang)見ELISA試(shi)劑盒系列

小鼠：IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-13、IL-10、IL-11、IL-17、TNF-α、TNF-β、VEGF、TGF-β1等

另有(you)(you)兔(tu)、豬、猴、雞、鴨、羊、植物等多種(zhong)種(zhong)屬(shu)ELISA試劑盒，所有(you)(you)試劑盒經過充分驗(yan)證，保證有(you)(you)效且(qie)重復性(xing)佳。

更新時間：2023/8/27 12:36:25