在(zai)ELISA實驗中我們經常(chang)會碰(peng)到(dao)試劑盒(he)變質(zhi)的問題，是(shi)什么原因導(dao)致(zhi)了ELISA試劑盒(he)的變質(zhi)呢？接(jie)下來我就和大家說一(yi)說導(dao)致(zhi)ELISA試劑盒(he)變質(zhi)的原因有哪些。
導致ELISA試劑盒變質的原因主要分為七種：
1、方(fang)法學的影響
ELISA測定(ding)模式包(bao)括以下幾種：雙(shuang)抗體夾(jia)心(xin)法(fa)、間接法(fa)、雙(shuang)抗原夾(jia)心(xin)法(fa)、IgM抗體捕捉法(fa)、競(jing)爭(zheng)抑制法(fa)，其中競(jing)爭(zheng)抑制法(fa)(HBeAb,HBcAb等(deng)采用)因受操(cao)作時(shi)差(cha)所引起的不公平競(jing)爭(zheng)等(deng)因素(su)的影響，結果重復(fu)性較(jiao)差(cha)，質量較(jiao)難控(kong)制。
2、試劑因(yin)素(su)
不同批(pi)次的(de)(de)ELISA試(shi)(shi)劑(ji)(ji)在制作過(guo)程(cheng)中(zhong)很難(nan)bao證質(zhi)量(liang)一致(zhi)，即(ji)使(shi)(shi)是通過(guo)批(pi)檢(jian)的(de)(de)項目其檢(jian)測(ce)結(jie)果也會存在差異，因(yin)此必須(xu)選擇和訂購長批(pi)號的(de)(de)試(shi)(shi)劑(ji)(ji)，并(bing)bao證保存條(tiao)件。 嚴格執行這一標(biao)準可以(yi)避免(mian)因(yin)試(shi)(shi)劑(ji)(ji)批(pi)號改變而重新建立質(zhi)控(kong)體(ti)系及重新評估(gu)試(shi)(shi)劑(ji)(ji)的(de)(de)復雜(za)過(guo)程(cheng)，并(bing)且能夠(gou)bao證結(jie)果的(de)(de)穩定性；對于效(xiao)期(qi)短、使(shi)(shi)用率低的(de)(de)試(shi)(shi)劑(ji)(ji)，應當小量(liang)分(fen)裝，每次使(shi)(shi)用則取分(fen)裝部(bu)分(fen)即(ji)可，避免(mian)反復凍融造成試(shi)(shi)劑(ji)(ji)的(de)(de)失效(xiao)。
3、樣本因素
標(biao)(biao)本(ben)干(gan)擾(rao)因(yin)素包括內(nei)源性(xing)(xing)干(gan)擾(rao)因(yin)素和外(wai)源性(xing)(xing)干(gan)擾(rao)因(yin)素，者包括類(lei)風濕因(yin)子、補體、異嗜(shi)性(xing)(xing)抗體、自(zi)身抗體、溶(rong)菌(jun)酶等(deng)，后(hou)者包括標(biao)(biao)本(ben)溶(rong)血、標(biao)(biao)本(ben)被(bei)細菌(jun)污染、標(biao)(biao)本(ben)貯存時間過長、標(biao)(biao)本(ben)凝固不全、冷凍標(biao)(biao)本(ben)的反復凍融等(deng)。
4、操作(zuo)因素
; ELISA操作步驟復雜，操作不(bu)當將(jiang)引起較(jiao)大的誤(wu)差。加樣、溫育、洗滌(di)、顯色、比色。
5、灰區的設置
通常情況下，ELISA定性(xing)(xing)實(shi)驗以“陽(yang)性(xing)(xing)”和“陰性(xing)(xing)”來(lai)報(bao)告結果(guo)，兩(liang)者間有一條分界線被稱(cheng)為“陽(yang)性(xing)(xing)判斷值(zhi)”(cut-off value，CO值(zhi))，這是定性(xing)(xing)免疫測(ce)定結果(guo)報(bao)告的(de)依(yi)據。
6、標本復查
ELISA手工檢(jian)測過程復雜(za)，影(ying)響(xiang)因素較多，即使室(shi)內質控(kong)在控(kong)，也可能因孔間差異而造成(cheng)結果的(de)差異，因此加大復查(cha)力度是bao證結果準確性的(de)可靠方法。
7、表示結果的常用方法
① 定性測定。
② 半定量(liang)測定，結果一般(ban)以滴度表示。
③ 定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)，即用已知量(liang)的(de)標(biao)準品作(zuo)一系(xi)列(lie)稀釋后進行ELISA測(ce)定(ding)，繪制標(biao)準曲線，結果以量(liang)或(huo)單位表示。在ELISA定(ding)量(liang)檢測(ce)中每一塊反應(ying)板都必(bi)須(xu)繪制相應(ying)的(de)標(biao)準曲線。
以上(shang)七種(zhong)導致(zhi)變(bian)質(zhi)的情況我(wo)們只要多加(jia)注意，ELISA試(shi)劑盒變(bian)質(zhi)的原因基本(ben)上(shang)也就不會存在(zai)了。
原創作者：上海恒遠生物科技有(you)限公司
總訪(fang)問量：7387230 