無血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)是(shi)在(zai)(zai)合成培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)的(de)(de)(de)(de)基(ji)(ji)礎(chu)上發(fa)展起來的(de)(de)(de)(de)，和傳統的(de)(de)(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)不一樣(yang)的(de)(de)(de)(de)是(shi)，它(ta)既能滿足細胞在(zai)(zai)體外長時間培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)的(de)(de)(de)(de)要求，也能避(bi)免動物(wu)血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)中所帶來的(de)(de)(de)(de)不利因素。無血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)的(de)(de)(de)(de)發(fa)展歷程(cheng)分為無血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)、無動物(wu)源(yuan)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)、無蛋白培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)及(ji)化學(xue)成分限定培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)四類。在(zai)(zai)使用無血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)時，有些細胞需要逐漸適應，即先將原來的(de)(de)(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)與無血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)混合培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)，再轉為完整的(de)(de)(de)(de)無血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)。有些貼壁生(sheng)長的(de)(de)(de)(de)細胞，復蘇時也可(ke)用少量的(de)(de)(de)(de)血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)先培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)（血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)可(ke)以幫助細胞貼壁），然后再轉為無血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)。
無血(xue)清(qing)培養(yang)基由營養(yang)較wan全的(de)基礎培養(yang)基和補充因子(zi)組成：
一、基礎培(pei)養基
在不同細胞(bao)培養(yang)時，根據細胞(bao)需求對成分(fen)已(yi)知的(de)(de)基(ji)礎培養(yang)基(ji)組分(fen)進行(xing)適當調(diao)整即可使(shi)細胞(bao)更好地(di)生長并提高目的(de)(de)產物(wu)的(de)(de)表達(da)量。大多數人(ren)工(gong)合成的(de)(de)培養(yang)基(ji)如DMEM、DMEM/F12、1640。
二、補充因(yin)子
補(bu)充因(yin)(yin)子是(shi)代替血清的各種(zhong)因(yin)(yin)子的總稱，大部(bu)分的無血清培養液必須要補(bu)加3-8種(zhong)因(yin)(yin)子，像胰島素、亞硒suan鈉和轉(zhuan)鐵蛋(dan)白是(shi)必須補(bu)充因(yin)(yin)子，其他多數為(wei)輔助作用的因(yin)(yin)子。
補充(chong)因子的功(gong)能不同可分為五類：
1.激素和生長因(yin)子
很多細胞用(yong)無血清培(pei)養(yang)時(shi)需要(yao)加入激(ji)素(su)(su)，如胰(yi)島(dao)素(su)(su)、生長激(ji)素(su)(su)、胰(yi)高糖素(su)(su)等。胰(yi)島(dao)素(su)(su)是(shi)重要(yao)的(de)(de)細胞存(cun)活因子，與細胞上的(de)(de)胰(yi)島(dao)素(su)(su)受(shou)體結合(he)后可促(cu)進(jin)RNA、蛋白質(zhi)和脂肪酸的(de)(de)合(he)成，抑制細胞凋亡。（雌二醇、孕酮(tong)等也是(shi)無血清培(pei)養(yang)基中常添加的(de)(de)補充因子）
2.結合蛋白
常(chang)見如轉鐵(tie)蛋白(bai)和(he)牛血清白(bai)蛋白(bai)轉鐵(tie)蛋白(bai)與細胞上的轉鐵(tie)蛋白(bai)受體結合是細胞獲取鐵(tie)元素(su)的主要來源。白(bai)蛋白(bai)與脂類、激素(su)、維(wei)生(sheng)素(su)、金屬離(li)子(zi)和(he)生(sheng)長因子(zi)結合后可調(diao)節上述(shu)物質在無血清培養基中活性的作用(yong)。（牛血清白(bai)蛋白(bai)添(tian)加的量一般比較大，增加培養基的粘度，保護細胞不受機械(xie)損傷）
3.貼壁因子
許(xu)多(duo)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)一(yi)定要貼(tie)壁才(cai)能生長，這(zhe)種(zhong)情況下無血清培(pei)養基中一(yi)定要添加促貼(tie)壁和擴(kuo)展的因(yin)子(zi)，一(yi)般為細(xi)(xi)胞(bao)(bao)外基質(zhi)，（如纖(xian)粘(zhan)連蛋白(bai)(bai)、膠原(yuan)蛋白(bai)(bai)等(deng)）它們(men)還是重要的分(fen)裂素以(yi)及維持正常細(xi)(xi)胞(bao)(bao)功(gong)能的分(fen)化(hua)(hua)因(yin)子(zi)，對許(xu)多(duo)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的繁殖(zhi)和分(fen)化(hua)(hua)起著重要的作(zuo)用。纖(xian)粘(zhan)連蛋白(bai)(bai)主要促進來自中胚(pei)層細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的貼(tie)壁與分(fen)化(hua)(hua)，這(zhe)些細(xi)(xi)胞(bao)(bao)包括成纖(xian)維細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、肉(rou)瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、粒(li)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、腎(shen)上(shang)皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、腎(shen)上(shang)腺皮(pi)質(zhi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、CHO細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、成肌(ji)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、CHO細(xi)(xi)胞(bao)(bao)等(deng)。
4.酶抑(yi)制(zhi)劑
培養(yang)貼壁生長(chang)的細胞，需要用(yong)胰(yi)酶(mei)消(xiao)化傳代，在無(wu)血清培養(yang)基(ji)中必不(bu)可少須含酶(mei)抑(yi)制(zhi)劑，以終止酶(mei)的消(xiao)化作用(yong)，達到保護細胞的目的。（常用(yong)的是(shi)大豆胰(yi)酶(mei)抑(yi)制(zhi)劑）
5.其他補充因子。
一(yi)些(xie)細(xi)胞培養使用的無血清培養基還需要補充微量元素、維生素、脂類等低分子量物質。
無血清培養基的優(you)點：
1）避免血清(qing)不同批次間的(de)(de)質量差(cha)異，提高細(xi)胞培養(yang)實(shi)驗(yan)結果的(de)(de)一致性。
2）避(bi)免血清(qing)對(dui)細胞的毒性作用和(he)血清(qing)源性污染。
3）避免血清組分對(dui)實驗研(yan)究(jiu)的影響。
4）有利于體外(wai)培養細胞的分化。
5）可提高目(mu)的(de)蛋白的(de)表達量并使產(chan)品(pin)易于分(fen)離純(chun)化。
6）組分(fen)穩定(ding)，可大量(liang)生產。
7）不(bu)含有絲分(fen)裂原抑制劑，可以促進(jin)細胞增殖(zhi)。
無血清培養基的缺點
1）細胞易受某(mou)些(xie)機械(xie)和化學因(yin)素的(de)影響，培養(yang)基沒有傳統合(he)成培養(yang)基方便。
2）成本高。
3）針對(dui)性(xing)強，一(yi)種無血清(qing)培(pei)(pei)養基(ji)僅適合某一(yi)類細胞的培(pei)(pei)養。
4）不(bu)同細(xi)胞對培養(yang)及營養(yang)成分的需求(qiu)不(bu)同。
5）雖然不添加動(dong)(dong)物(wu)(wu)(wu)血清，但(dan)為了細胞的(de)生長，培養基中依然包含(han)大(da)量(liang)動(dong)(dong)植物(wu)(wu)(wu)來源蛋白，添加物(wu)(wu)(wu)質的(de)化(hua)學成分也不夠明確。
三、生(sheng)產生(sheng)物制品
目(mu)，生產(chan)生物(wu)(wu)(wu)活性蛋白、疫苗、單克(ke)隆抗(kang)體和(he)基因治療(liao)藥物(wu)(wu)(wu)的(de)(de)表達(da)載體等生物(wu)(wu)(wu)制品(pin)時一般都采用可高密度生長的(de)(de)動(dong)(dong)物(wu)(wu)(wu)工程(cheng)細胞。無血清培養(yang)技(ji)術的(de)(de)運用，給動(dong)(dong)物(wu)(wu)(wu)工程(cheng)細胞提(ti)供了(le)更(geng)優的(de)(de)條件，進而表達(da)更(geng)多的(de)(de)目(mu)的(de)(de)產(chan)物(wu)(wu)(wu)，并(bing)有利于后(hou)續(xu)目(mu)的(de)(de)產(chan)物(wu)(wu)(wu)的(de)(de)分離和(he)純化。
四、基礎研究域
雖然基礎培(pei)養基加少量血(xue)清(qing)所配制的(de)wan全培(pei)養基可以滿足大部(bu)分細(xi)胞培(pei)養的(de)要求，但對有些(xie)實驗卻不適(shi)合。
【如，在(zai)利用(yong)DC腫瘤(liu)疫苗(miao)治療時，所(suo)需(xu)要(yao)的(de)樹(shu)突狀細(xi)胞和用(yong)于抗原(yuan)致敏的(de)腫瘤(liu)細(xi)胞，往(wang)(wang)往(wang)(wang)在(zai)胎牛血(xue)(xue)清(qing)中進行培養，這(zhe)就很難分辨哪些(xie)免(mian)疫反應是由(you)血(xue)(xue)清(qing)引(yin)起的(de)而不是真正的(de)先天免(mian)疫系(xi)統的(de)作用(yong)，需(xu)要(yao)使(shi)用(yong)成(cheng)分明確的(de)無血(xue)(xue)清(qing)培養基(ji)排除動物血(xue)(xue)清(qing)的(de)干(gan)擾。】
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