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運輸(shu)(shu)條件:低(di)溫運輸(shu)(shu),用干(gan)冰(bing)或者(zhe)冰(bing)袋低(di)溫運輸(shu)(shu)。
試劑盒組成
1 | 30倍濃(nong)縮洗滌液 | 20ml×1瓶(ping) | 7 | 終(zhong)止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標(biao)試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標準(zhun)品(8000 nmol/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標(biao)包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品稀釋液(ye) | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣(yang)品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說(shuo)明(ming)書 | 1份 |
5 | 顯色(se)劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜(mo) | 2張(zhang) |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個(ge) |
ELISA測定(ding)中影響因素較(jiao)多,而且其操作中有(you)一定(ding)的技術要求,在臨(lin)床檢驗中除正常(chang)反應外,有(you)時常(chang)可見到一些錯誤結(jie)果(即假(jia)陽性(xing)或假(jia)陰性(xing))如標本的影響,對(dui)這一方(fang)面上海(hai)恒遠生物來為(wei)大家細(xi)細(xi)解讀:
1. 溶血標本(ben)及混有紅細胞的血清(qing)采用ELISA法檢測(ce)易產生假陽性(xing)。可能是溶血(xue)血(xue)清中含(han)有(you)過氧(yang)化酶物質(紅(hong)細胞或血(xue)紅(hong)蛋白中的亞(ya)鐵血(xue)紅(hong)素),在洗滌過程中往往難以完(wan)全洗脫,它可使H2O2釋放(fang)出原生態氧(O),從而催化底(di)物四(si)甲基聯苯(ben)胺(an)生(sheng)成(cheng)可溶(rong)性的有(you)色物質,即顯藍色,產(chan)生(sheng)假陽(yang)性。所以嚴重溶(rong)血標本禁(jin)用。
2. 標本受細(xi)菌(jun)污(wu)染。因菌(jun)體(ti)中可能含有內源(yuan)性辣(la)根過氧化物酶,因此,被細(xi)菌(jun)污(wu)染的標本同溶血(xue)標本一樣,亦可產生非特異性顯色而干擾測定結(jie)果。
3. 標本(ben)保(bao)存不當(dang)。在冰箱中(zhong)保(bao)存過久(jiu)的標本(ben),在間接法ELISA測(ce)定中會導致(zhi)本底過深、造成假(jia)陽性;為(wei)克服(fu)上述干(gan)擾,ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮(xian)采(cai)集(ji);如不(bu)能立即測定,5 d內(nei)測定的血清標本可存放于(yu)4℃,1周后(hou)測定的血清(qing)標本(ben)(ben)應(ying)低溫(wen)凍(dong)存;凍(dong)存后(hou)融(rong)解的標本(ben)(ben),蛋白質(zhi)局部濃(nong)縮,分(fen)布(bu)不均,應(ying)充分(fen)混(hun)合后(hou)再測定,但混(hun)勻時(shi)應(ying)輕柔,不可強(qiang)烈振蕩。
“小鼠干細胞因子受體ELISA試劑盒”優勢介紹:
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試劑的準備
1. 標(biao)(biao)準(zhun)品:標(biao)(biao)準(zhun)品的系列稀釋應在實驗時(shi)準(zhun)備,不能儲存。稀釋前將(jiang)標(biao)(biao)準(zhun)品振蕩混勻。稀釋比(bi)例按下表中進行:
400 pg/ml | (6號標(biao)準品) | 原倍濃度不用(yong)稀釋(shi)直接加入50ul |
200 pg/ml | (5號標準品) | 100ul的原倍標準(zhun)品加入100ul的(de)標(biao)準品稀釋(shi)液 |
100 pg/ml | (4號(hao)標準(zhun)品) | 100ul的5號標準(zhun)品加入100ul的標準品(pin)稀(xi)釋(shi)液 |
50 pg/ml | (3號標準品) | 100ul的4號標準品加入100ul的標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋液 |
25 pg/ml | (2號標(biao)準品) | 100ul的3號(hao)標準(zhun)品(pin)加(jia)入100ul的標(biao)準品稀釋液(ye) |
12.5 pg/ml | (1號標準品(pin)) | 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
0 pg/ml | (空白對照) | 原(yuan)倍濃度不用稀(xi)釋直接加入50ul |
2. 洗滌緩沖液(ye)(50×)的稀釋:蒸餾水(shui)50倍稀釋。
ELISA浸泡式(shi)洗滌:
1. 吸干(gan)或甩干(gan)孔(kong)內反應液;
2. 用洗(xi)滌液(ye)過(guo)洗(xi)一(yi)遍(bian)(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);
3. 浸泡,即將洗滌液注(zhu)滿板孔,放置(zhi)1-2分鐘,間(jian)歇(xie)搖(yao)動,浸(jin)泡時間(jian)不可隨意縮短;
4. 吸干孔(kong)內(nei)液體。吸干應徹底(di),可(ke)用水泵或真空泵抽(chou)吸,也可(ke)甩去液體后在清(qing)潔毛巾或吸水紙(zhi)上拍干;
5. 重復操作c和d,洗滌3-4次(或按說明規定)。在間接法中(zhong)如本底較高(gao),可增加(jia)洗滌次(ci)數或延長浸泡(pao)時(shi)間。
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更(geng)新時間(jian):2024/4/29 9:44:07
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