檢(jian)測范圍:2ng/L -90ng/L
使(shi)用目的:
僅供(gong)科研使用,本試劑盒用于(yu)測(ce)定兔(tu)血(xue)清(qing)樣,血(xue)漿及相關液體樣本中谷丙轉氨酶(mei)(ALT)含量(liang)。
實驗原(yuan)理:
本(ben)試劑(ji)盒應用(yong)雙抗(kang)(kang)體(ti)夾心(xin)法測(ce)定標(biao)本(ben)中(zhong)兔谷(gu)丙(bing)(bing)(bing)轉氨(an)酶(ALT)水平。用(yong)純化的兔谷(gu)丙(bing)(bing)(bing)轉氨(an)酶(ALT)抗(kang)(kang)體(ti)包(bao)被微(wei)孔(kong)板,制(zhi)成(cheng)固相(xiang)抗(kang)(kang)體(ti),往包(bao)被單抗(kang)(kang)的微(wei)孔(kong)中(zhong)依次加入谷(gu)丙(bing)(bing)(bing)轉氨(an)酶(ALT),再(zai)與HRP標(biao)記的谷(gu)丙(bing)(bing)(bing)轉氨(an)酶(ALT)抗(kang)(kang)體(ti)結合,形(xing)成(cheng)抗(kang)(kang)體(ti)-抗(kang)(kang)原-酶標(biao)抗(kang)(kang)體(ti)復(fu)合物,經過洗滌后加底物TMB顯色(se)。TMB在(zai)HRP酶的催化下(xia)轉化成(cheng)藍色(se),并在(zai)酸的作(zuo)用(yong)下(xia)轉化成(cheng)終(zhong)的黃色(se)。顏色(se)的深淺和樣品中(zhong)的谷(gu)丙(bing)(bing)(bing)轉氨(an)酶(ALT)呈正相(xiang)關。用(yong)酶標(biao)儀在(zai)450nm波長下(xia)測(ce)定吸(xi)光度(OD值(zhi)),通過標(biao)準曲(qu)線計算樣品中(zhong)兔谷(gu)丙(bing)(bing)(bing)轉氨(an)酶(ALT)濃度。
【注意事項】
1.請每次測(ce)定(ding)的同時(shi)(shi)做(zuo)標準(zhun)曲線(xian),做(zuo)復孔。如標本(ben)中待測(ce)物質(zhi)含量過高(樣(yang)本(ben)OD值(zhi)大于(yu)標準(zhun)品孔的OD值(zhi)),請先用(yong)樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)一定(ding)倍(bei)(bei)數(n倍(bei)(bei))后(hou)再測(ce)定(ding),計算(suan)時(shi)(shi)請乘以(yi)總(zong)稀(xi)釋(shi)倍(bei)(bei)數(×n×5)。
2.封板(ban)膜(mo)只限一次性使用(yong),以避免(mian)交叉(cha)污染。
3.為免交叉污染,要避免重復(fu)使用手中(zhong)的(de)吸頭和試管。
4.要嚴格避(bi)免(mian)操作過程中酶標板干燥。干燥會使酶標板上生物(wu)成份(fen)迅速(su)失活(huo)。
5.嚴格按照(zhao)說(shuo)明書的操(cao)作進行,試驗結果判定必須以(yi)酶(mei)標儀(yi)讀數為準。
6.顯(xian)(xian)色(se)時(shi)間供(gong)參考,因用戶實(shi)驗室條件差異,顯(xian)(xian)色(se)時(shi)間會有所不(bu)同。
7.所(suo)有(you)樣品,洗滌液和各種廢(fei)棄物(wu)(wu)都應按(an)傳染(ran)物(wu)(wu)處(chu)理。
8.本試劑不(bu)同批號(hao)組分不(bu)得混用。
9.揭封(feng)板(ban)膜(mo)和覆(fu)蓋(gai)封(feng)板(ban)膜(mo)時(shi)應避免(mian)用(yong)力過大(da)導致液(ye)體濺(jian)出。
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