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試劑盒組成(cheng)
1 | 30倍(bei)濃縮洗滌液(ye) | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標試劑(ji) | 6ml×1瓶 | 8 | 標(biao)準品(8000 nmol/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標(biao)包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明(ming)書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶(ping) | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封(feng)袋(dai) | 1個(ge) |
ELISA測定中(zhong)影(ying)響因(yin)素較多,而且(qie)其(qi)操(cao)作(zuo)中(zhong)有一定的技術要求,在臨床檢驗中(zhong)除正常反應外,有時常可見(jian)到一些(xie)錯誤結果(即假陽(yang)性或假陰(yin)性)如標本的影(ying)響,對這一方面上海恒遠生物來(lai)為(wei)大家細(xi)細(xi)解讀:
1. 溶血標本(ben)及混有(you)紅細胞的血清采(cai)用ELISA法檢測易產(chan)生假陽(yang)性。可能是溶血血清(qing)中(zhong)含有過氧化酶物質(紅(hong)(hong)細胞(bao)或血紅(hong)(hong)蛋白中(zhong)的亞鐵血紅(hong)(hong)素),在洗滌過程中(zhong)往(wang)往(wang)難以完全洗脫,它可使H2O2釋放(fang)出原生態氧(O),從而催(cui)化底物四甲基聯苯胺生成可溶性的有(you)色物質,即顯藍色,產生假陽性。所以(yi)嚴重溶血標本禁用(yong)。
2. 標(biao)本(ben)受細菌污染(ran)。因(yin)(yin)菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶,因(yin)(yin)此(ci),被(bei)細菌污染(ran)的標(biao)本(ben)同溶血標(biao)本(ben)一樣,亦可產生非(fei)特異性顯色而干擾測定結果。
3. 標本(ben)保存不當(dang)。在冰箱中(zhong)保存過久的標本(ben),在間(jian)接(jie)法ELISA測(ce)定中(zhong)會導致(zhi)本底過深、造(zao)成假陽(yang)性;為(wei)克服上述干擾,ELISA試劑盒測定的(de)血清標本(ben)宜(yi)為新鮮采集;如不(bu)能立即測定,5 d內測(ce)定的血清標本可存放于4℃,1周后(hou)測(ce)定的血清(qing)標本應低溫凍存;凍存后(hou)融(rong)解的標本,蛋(dan)白質局部濃(nong)縮(suo),分布不均,應充(chong)分混(hun)合后(hou)再(zai)測(ce)定,但(dan)混(hun)勻時應輕柔,不可強烈振蕩。
“豚鼠二胺氧化酶ELISA試劑盒”優勢介紹:
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試劑的準備
1. 標準(zhun)品:標準(zhun)品的(de)系列稀釋(shi)(shi)應在(zai)實(shi)驗時(shi)準(zhun)備(bei),不能(neng)儲存。稀釋(shi)(shi)前將標準(zhun)品振(zhen)蕩混(hun)勻。稀釋(shi)(shi)比例按下表(biao)中進行:
400 pg/ml | (6號標準品) | 原倍濃度(du)不用稀釋直接(jie)加入(ru)50ul |
200 pg/ml | (5號標準品) | 100ul的原(yuan)倍標準(zhun)品加(jia)入100ul的(de)標準品稀釋液 |
100 pg/ml | (4號標(biao)準品) | 100ul的5號標準品(pin)加(jia)入100ul的標準品稀釋液(ye) |
50 pg/ml | (3號標(biao)準(zhun)品) | 100ul的(de)4號(hao)標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
25 pg/ml | (2號(hao)標準(zhun)品(pin)) | 100ul的3號(hao)標準品(pin)加入100ul的標準品(pin)稀釋液(ye) |
12.5 pg/ml | (1號標準品) | 100ul的2號標(biao)準品加入100ul的標準品稀釋液 |
0 pg/ml | (空白對照) | 原倍濃度不用稀(xi)釋直(zhi)接加(jia)入50ul |
2. 洗滌(di)緩沖液(50×)的稀釋(shi):蒸餾水50倍(bei)稀釋。
ELISA浸泡式洗滌(di):
1. 吸(xi)干(gan)或甩干(gan)孔內反應(ying)液;
2. 用洗滌(di)液(ye)過洗一遍(將(jiang)洗(xi)滌液注滿板孔后(hou),即甩去);
3. 浸泡,即將(jiang)洗滌(di)液注滿板孔(kong),放置1-2分(fen)鐘,間歇(xie)搖動(dong),浸泡時間不可隨意縮短;
4. 吸(xi)干孔內液(ye)體。吸(xi)干應徹(che)底,可用水(shui)泵或真(zhen)空泵抽吸(xi),也(ye)可甩去(qu)液(ye)體后在清潔毛巾或吸(xi)水(shui)紙上拍(pai)干;
5. 重復操(cao)作(zuo)c和d,洗滌3-4次(或(huo)按說(shuo)明規定(ding))。在間(jian)接(jie)法中如(ru)本底較高,可增(zeng)加洗滌次數或延(yan)長(chang)浸泡時間(jian)。
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更(geng)新時間:2024/5/14 9:31:48
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